Моноклональные антитела очень дороги из-за стоимости и сложности производства, а также необходимости их применения в относительно высоких дозах. Хотя затраты на сырье низкие, процесс очистки антител покрывает более 50% общей стоимости. Поэтому снижение затрат на этот процесс является ключевым моментом, чтобы сделать биопрепараты на основе моноклональных антител доступными для масс.
Очистка антител или Fc-гибридных белков – это сложный процесс, успешность которого, в первую очередь, зависит от аффинной хроматографии на носителе с иммобилизованным протеином А, применяемой на этапе захвата целевых соединений. Катионообменная хроматография или хроматография гидрофобного взаимодействия задействованы на промежуточных этапах очистки, а анионообменная – на заключительном. Компания НаноМикроТех предлагает конкурентоспособные хроматографические продукты на полимерной основе для всех этих этапов.
Сорбент UniMab от вышеназванной компании имеет жесткую монодисперсную полиметакрилатную матрицу, на которой иммобилизован протеин А. Этот сорбент характеризуется превосходной механической прочностью, высокой динамической связывающей способностью при высокой скорости потока (35-45 мг/мл за 1-2 мин) и стабильностью в щелочных условиях, что повышает эффективность производства и делает его особенно подходящим для продолжительного использования. Кроме того, UniMab обладает высоким массопереносом. Это позволяет значительно сократить объемы уравновешивающего и элюирующего буферов, тем самым еще больше снижая стоимость производства. НаноМикроТех также разработала NanoGel-50SP, монодисперсный катионообменник, сравнимый с хорошо зарекомендовавшим себя носителем для эффективного удаления агрегатов – POROS XS от Thermofisher. Весьма конкурентоспособными вариантами для «тонкой» очистки антител с помощью анионообменной хроматографии являются как UniGel-80Q, так и NanoGel-50Q.
Применение сорбентов производства компании НаноМикроТех для очистки антител, Fc-гибридных белков и конъюгатов антитело-лекарственное средство:
Целевые соединения |
Этап очистки |
Режим разделения |
Конкурентные преимущества продукции НаноМикроТех |
Результаты |
||
Связывающая способность (мг/мл) |
Чистота (%) |
Выход (%) |
||||
mAbs |
Захват |
Аффинность (протеин А) |
Высокая связывающая способность при высокой скорости потока (30 мг/мл за 2 мин); возможность использовать колонки высотой >25 см; высокая устойчивость к щелочам (0,5М NaOH CIP); меньшее потребление буфера |
45 (UniMab) 55 (UniMab Pro) |
98,0 |
90,0 |
Промежуточная очистка |
Обмен катионами (сильнокислотный катионообменник) |
Высокая солеустойчивость (100мМ NaCl); высокая эффективность удаления агрегатов; высокое разрешение; высокий массоперенос |
100 |
99,0 |
90,0 |
|
Промежуточная очистка |
Обмен катионами (сильнокислотный катионообменник) |
Высокая эффективность колонок; высокая связываюшая способность; высокий выход |
120 |
99,0 |
90,0 |
|
Промежуточная очистка |
Смешанный: гидрофобное взаимодействие и обмен катионами (слабокислотный катионообменник) |
Высокая солеустойчивость (300мМ NaCl); высокая селективность; высокое разрешение |
30-50 |
99,0 |
85,0 |
|
«Тонкая» очистка |
Обмен анионами (сильноосновный анионообменник) |
Высокий выход; высокая скорость потока; высокая связываюшая способность |
100-200 |
99,0 |
90,0 |
|
«Тонкая» очистка |
Смешанный: гидрофобное взаимодействие и обмен катионами (слабокислотный катионообменник) |
Высокое разрешение; высокая скорость потока |
30-50 |
90,0 |
91,0 |
|
Fc-гибридные белки |
Захват |
Аффинность |
Высокая связывающая способность при высокой скорости потока (30 мг/мл за 2 мин); возможность использовать колонки высотой >25 см; высокая устойчивость к щелочам (0,5М NaOH CIP); меньшее потребление буфера |
45 (UniMab) 55 (UniMab Pro) |
98,0 |
90,0 |
Промежуточная очистка |
Гидрофобное взаимодействие |
Высокое разрешение; высокая эффективность удаления агрегатов; высокая эффективность удаления деградировавших фрагментов |
20 |
99,0 |
90,0 |
|
«Тонкая» очистка |
Обмен анионами (сильноосновный анионообменник) |
Высокая скорость потока |
150 |
99,0 |
90,0 |
|
Конъюгаты антитело-лекарственное средство |
«Тонкая» очистка |
Гидрофобное взаимодействие |
Высокое разрешение; высокая селективность |
30-50 |
99,0 |
85,0 |
Fab-фрагменты антител |
«Тонкая» очистка |
Обмен катионами (сильнокислотный катионообменник) |
Высокое разрешение; высокая эффективность удаления деградировавших фрагментов |
30 |
99,0 |
85,0 |
Биспецифические антитела |
Промежуточная очистка |
Смешанный: гидрофобное взаимодействие и обмен катионами (слабокислотный катионообменник) |
Высокое разрешение; высокая эффективность удаления агрегатов неподходящих антител |
30-50 |
95,0 |
80,0 |